本試劑盒只能用于科學(xué)研究，不得用于醫(yī)學(xué)診斷
人（Human）胰蛋白酶原Ⅱ（Try-Ⅱ）ELISA檢測試劑盒
使用說明書
檢測原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預(yù)
先包被胰蛋白酶原Ⅱ（Try-Ⅱ）抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、
標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯
色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成
zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的胰蛋白酶原Ⅱ（Try-Ⅱ）呈正相
關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。
樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞
刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地
分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘
取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于
-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
自備物品
1. 酶標(biāo)儀（450nm）
2. 高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
操作注意事項
1. 試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20 分鐘。從冰箱取出的
濃縮洗滌液會有結(jié)晶，這屬于正?，F(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶*溶解
后再使用。
2. 實驗中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。
3. 濃度為0 的S0 號標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對照或者空白；按照說明obtained for each of the six standard concentrations on the vertical （Y） axis
versus the corresponding concentration on the horizontal （X） axis.
2. First, calculate the mean O.D. value for each standard and sample. All O.D.
values, are subtracted by the mean value of the zero standard before result
interpretation. Construct the standard curve using graph paper or statistical
software.
3. To determine the amount in each sample, first locate the O.D. value on the
Y-axis and extend a horizontal line to the standard curve. At the point of
intersection, draw a vertical line to the X-axis and read the corresponding
concentration.
4. Any variation in operator, pipetting and washing technique, incubation time or
temperature, and kit age can cause variation in result. Each user should obtain
their own standard curve.
5. The sensitivity by this assay is 1.0 ng/ml
6. Standard curve
Storage： 2-8℃.
validity： six months.
FOR RESEARCH USE ONLY; NOT FOR THERAPEUTIC OR
DIAGNOSTICAPPLICATIONS! PLEASE READ THROUGH
ENTIRE PROCEDURE BEFORE BEGINNING!